شناسایی،جداسازی و مقایسه فعالیت های بیوشیمایی آنزیم کلسترول اکسیدازباکتری های بومی خاک لرستان جهت استفاده بعنوان آفت کش بیولوژیکی پنبه

آنزیم کلسترول اکسیداز باکتریایی( (cox, ec 1.1.3.6یک آنزیم مونومر دو عملکردی وابسته فلاوین آدنین دی نوکلئوتید است که واکنش اکسیداسیون وایزومریزاسیون کلسترول را در حضور اکسیژن مولکولی کاتالیز و تولید 4-کلستن-3- ان و پراکسید هیدروژن می کند و از مهمترین آنزیمهای تجاری دنیاست.کلسترول اکسیداز بعنوان نسل چهارم آفت کش های بیولوژیکی با خاصیت آفت کشی قوی بر روی آفات سرخرطومی و کرم غوزه پنبه جهت تولید گیاه پنبه تراریخت مقاوم به آفات درکشاورزی کاربرد دارد.این آنزیم توسط برخی باکتری های گرم مثبت و منفی تولید می شود.مطالعه حاضر با هدف شناسایی،جداسازی و مقایسه فعالیت های بیوشیمیایی آنزیم کلسترول اکسیداز باکتری های بومی خاک لرستان جهت استفاده بعنوان آفت کش بیولوژیکی پنبه انجام شد. با کشت 130 نمونه در محیط های غربالگری حاوی کلسترول به عنوان تنها منبع کربن و انجام تست های تاییدی رنگ سنجی قرمز و قهوه ای نمودن محیط کشت،جداسازی وتایید فعالیت کلسترول اکسیدازی باکتری ها صورت گرفت.سپس ارزیابی فعالیت آنزیم ها تحت شرایط دماها وph های مختلف بررسی گردید.شناسایی مقدماتی باکتری ها با استفاده آزمایشات بیوشیمیایی و میکروبیولوژی انجام و در آخرجهت تعیین گونه سویه ها و جداسازی ژن کلسترول اکسیداز،قسمتی از توالی ژنوم آنها بوسیله تکنیک pcr تکثیر و بعد توالی یابی شد.در این مطالعه 4 گونه استرپتومایسسa، استرپتومایسسb، رودوکوکوسc و سلیولوسی میکروبیومd با توانایی تولید آنزیم کلسترول اکسیداز از خاک جداسازی گردید که بیشترین فعالیت آنزیمی با مقدار u/ml 2/44در دمای c ° 45 و 7=ph مربوط به سویه استرپتومایسسa بود.همچنین ژن کلسترول اکسیداز باکتری رودوکوکوس c با استفاده از پرایمرهای اختصاصی جداسازی شد.